Substantive defective de gen exemple

Des exemples de ces applications sont fournis ici et résumés dans la figure 2. Nasmyth et Reed 1980; Carlson et Botstein 1982) dans des vecteurs dérivés du plasmide 2 μ endogène, qui sont maintenus à 10 – 30 copies par cellule (rose et Broach 1990). En principe, la concurrence pourrait perturber un complexe multiprotéique en sous-ensembles non fonctionnels, concurrencer des facteurs partagés loin de la participation à d`autres complexes, ou séquestrer des protéines individuelles. Par exemple, lorsque GAL3 est surexformulé dans la levure, il provoque l`expression inappropriée des gènes induits par le galactose dans le milieu contenant du glucose, qui est inversé par la co-surexpression de sa cible, Gal80 (Suzuki-Fujimoto et al. Le mécanisme le plus courant est probablement par des modifications post-traductionnelles. Bender et Pringle 1989), cimentant son application pour étudier essentiellement tout processus biologique. Plus précisément, les régions nécessaires pour le phénotype de surexpression sont-elles corrélées avec les régions requises pour la complémentation ou la fonction in vivo, et sont-elles corrélées avec des sites de liaison pour d`autres macromolécules? Des écrans de surexpression ont ainsi été établis comme une option de recherche viable dans de multiples organismes. Fait intéressant, dans l`étude initiale de la preuve de principe (Kroll et coll. La stratégie de surexprimant les dérivés catalytiquement inactifs peut fournir des informations mécanistiques lorsque des mutations de sites catalytiques bien caractérisées sont disponibles. Ceci a permis des écrans pour des suppressions de levure qui ont amélioré leur toxicité, fournissant des aperçus de leurs mécanismes pathologiques (le et al.

Voir le texte pour plus de détails. Sandegren et Andersson 2009). Par exemple, les formes pathologiques de la huntingtine humaine ou α-Synuclein qui causent la maladie de Huntington et la maladie de Parkinson, respectivement, ont été surexexprimées dans la levure, où ils ont formé des organismes d`inclusion. L`expression hétérologue a également été exploitée pour étudier les fonctions génétiques à travers les barrières d`espèces. Dans une autre application de la surexpression à la technologie des cellules souches, la surexpression combinatoire de Brn2, Ascl1 et Myt1l induit la génération de cellules neuronales à partir de fibroblastes ou de cellules souches pluripotentes humaines (Pang et al. la modération est une chose fatale. Clark-Adams et coll. L`année dernière a apporté la première application à grande échelle de bibliothèques systématiques dans les écrans suppresseurs de dosage. Shaham et Horvitz 1996) en utilisant des phénotypes de surexpression. Comme il est résumé ici, les études de surexpression offrent plusieurs avantages: (1) c`est un outil polyvalent qui peut être appliqué de plusieurs façons dans des milieux de type sauvage et mutant; (2) il peut identifier les mesures réglementaires limitant les taux; (3) il a des effets dominants, de sorte qu`il peut être exécuté facilement chez les organismes diploïdes; (4) il fournit des liens fonctionnels même pour les gènes redondants; et (5) il identifie les interactions complémentaires des écrans de perte de fonction.

Dans une approche, un plasmide qui surexdite un seul gène est introduit dans la collection de suppression de levure pour identifier les suppressions qui ont des défauts de croissance plus sévères lorsque ce gène est surexexprimé. L`isolement supplémentaire de CLN3 comme suppresseur à copie élevée a permis un test direct et une confirmation du modèle de redondance. Cet État refoulé peut être surmonté par la surexpression de GAL4, qui titrent simplement Gal80 (Nogi et coll. Comme on l`a vu plus loin (et dans Herskowitz 1987), cependant, la surexpression des protéines de type sauvage et mutantes peut provoquer des phénotypes hypermorphiques et néomorphiques, de sorte que l`utilisation du terme dominant négatif ou antimorphique est mieux réservée lorsque des l`information sur la fonction du gène est disponible. Xu et coll. Premièrement, il existe de nombreux exemples dans lesquels les maladies humaines sont directement causées par une augmentation de l`expression génique (Shastry 1995; Santarius et coll. Cette amplification sélective de petites régions chromosomiques constituait un avantage majeur par rapport aux phénotypes d`investigation causés par des réarrangements chromosomiques bruts ou des ANEUPLOIDIES.